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              液相色譜柱的柱長及內徑的選擇要點分享

              發布時間:2022-08-18   點擊次數:488次
                液相色譜柱在使用前,要進行柱的性能測試,并將結果保存起來,作為評價柱性能變化的參考。在做柱性能測試時要按照出廠報告中的條件進行,只有這樣,測得的結果才有可比性。
               
                液相色譜柱的柱長及內徑的選擇:
               
                長度的選擇:柱越長,總柱效越高(n值越大),柱越長,分析時間也越長。250—300mm是普遍的柱長,實驗室一半以上的工作都是采用此規格柱子,一般用來分離l0到50個組份的中等至復雜混合物;500—600mm,要求較高分辨率的應用,—般用來分離大于50個組份或包含有難分離物質的復雜樣品程序升溫分析。
               
                內徑:柱效率與柱半徑平方成反比,內徑越小柱效越高,但內徑越大,柱容量也增加,允許進樣量就越多。當進樣量超過柱容量時,則因柱內每塊理論板內不能建立真正的平衡,將會導致色譜蜂畸變,柱分辨率降低,重現性不好。因此對于復雜樣品需要準確分離,必須使用小內徑柱子。另一方面若樣品中存在具有很不相同濃度組份化合物,為了增加樣品容量就必須使用內徑大的柱子,目前實驗室使用常見的柱子內徑一般是4.6mm。
               
                一般選擇原則:分析大分子量化合物選擇大孔徑;對于高pH值或者堿性化合物需要選擇高封端或者特殊封端的色譜柱,以改善峰形,延長使用壽命等。
               
                現在商品化的液相色譜柱琳瑯滿目,根據參數可以給我們提供一個初步的選擇,但由于各個儀器廠商的填料技術和鍵合技術都有差異,即使都是C18柱,同一品牌不同系列都有不同的功能,有能耐受低pH值的、有耐高溫的、有適合堿性樣品的等等。所以在選擇前要好好研究參數,仔細閱讀說明書,才能找到合適的色譜柱和適宜的分離方法。
               

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